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【微生物检测】谈谈我对4789系列标准及其细节的理解!

来源:918博天堂 时间:2017-11-02

微生物检测这个命题相信大家都不会陌生,毕竟我们都是从事这方面工作的。在实验室里,我们需要跟各种检测方法、细菌真菌以及检测设备等打交道,对微生物检测领域也肯定会存在这样或者那样的问题,面对这些问题你是怎么解决的?你有哪些好的微生物检测工作经验?

现在,食品伙伴网面向广大网友进行微生物检测有奖征文竞赛啦!希望大家仔细阅读活动细则,本着“他山之石,可以攻玉”的心态,互相学习,经验互享,以便日后能更好的开展工作。


【微生物检测】谈谈我对4789系列标准及其细节的理解!

作者:quanquan920223


还记得刚上大学时,老师对我们讲,现在食品安全的关注度非常高,你们的就业前景很好,而后还举了几个成功校友的例子。当时听信了这句话,可到了大四要找实习单位的时候却感觉并不那么如意。


还好,几个月后我辗转到了离家八百多公里的一家食品厂,开始真正地接触检验检测工作。那时,除了在校期间的实验课和专业课外,我可以说是没有看过与专业知识有关的书,所以导致说到某些标准号,我根本听都没听过。于是,在我入职的第一周内,我除了和要离职的同事交接工作,剩下的时间都在看国标。


那时,我们用的还是03版4789系列,还没有三级采样,还没有n、c、m、M值,也还没有大肠菌群的平板计数法。那么可能有人说,为什么三年前你们执行的是03版,不应该是10版吗?这就反映了一个问题,很多产品标准并没有随着4789系列标准的更新而同步换版,只能延续老版的标准,出现脱节的现象。


转眼已经3年,4789系列标准已经更新到2016版,虽然还有一个GB/T 4789.3-2003顽强的存在着。那我就来谈谈我对4789系列国标(常规微生物方面)的理解,纯属个人+他人观点,如有雷同,那就对了!


首先来谈一下总则GB 4789.1,很多小伙伴“一入坑”就上手菌落总数、大肠菌群等卫生指标菌的检测,而忽视了这些检验的基础及原则,经常会看到论坛有人问“n、c、m、M是什么意思”类似的问题,也看得到大佬们的悉心解答,总感觉我们解答的人比他们自己都要急切地让他们明白。


GB 4789.1-2016  食品安全国家标准 食品微生物学检验 总则》 理解

总则正文第一句话,“本标准规定了食品微生物学检验基本原则和要求”,已经很明确的告诉我们检验基本原则和要求就在这,你们快来看吧!然后标准从基本要求、样品采集、检验、生物安全和质量控制、记录与报告、检样后处理几个方面展开了详细的内容。基本要求即为“人、机、料、法、环”五大要素,也是实验室质量控制的切入点。


样品采集中规定了采样方案,目前大多数产品标准也都规定选取三级采样方案,为什么采取n、c、m等值呢,这是在跟国际接轨呀,虽然说三级采样使得化验员工作量增加了,但是要求更严格,企业为了更好的质量更规范的生产,也从另一反面增加了食品安全系数。然后就是检验过程,对应一系列的检验标准啦。


标准最后规定了“剩余样品和同批产品不进行微生物项目的复检”,为什么呢,微生物的分部可谓极不规则,即使是同一样品的不同部位,也无法保证它微生物检验的重复性,更何况是不同的样品呢,故而即使复检,所得结果也不具有参考价值。


GB 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》理解

然后来看GB 4789.2,作为大多数产品的卫生指示菌,菌落总数的测定相信是很多新手的“第一道菜”。除了总则规定的基本要求外,此标准规定了检验程序,检验设备,计数方法和报告方式等。


检验程序估计大家都能倒背如流了,就不多赘述了,主要说说个人对这几点的理解。制备梯度稀释液时,磷酸盐缓冲液可以更好得调节样液的PH,减少样液PH的不稳定带来的影响。


然后是培养,一般要求实验开始到倾注平板在15min内进行,可有效减少污染;还有,如果某个产品做出来总是有菌落蔓延的情况,那么可以采用二次覆盖法来避免此类情况。


最后,计数和报告,规定选取菌落数在30-300之间的平板进行计数,例如,10倍和100倍稀释度平板菌落数分别为271,283,25,34,结果计算式为(271+283+34)/【(2+0.1*1)*10-1】。报告方式,微生物检验均采取“四舍五入”的修约规则,小于100时,以整数报告,大于100时以科学计数法保留两位有效数字,或修约后取前两位,其余以0代替。


《GB4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》 理解

接着来看同为卫生指标菌——大肠菌群的检测GB4789.3,在以往的MPN法外又增加了平板计数法,由于公司产品大多采用平板计数法,所以探讨下平板计数及证实试验的细节。


梯度稀释,同菌落总数,倾注VRBA培养后续观察菌落特征进行证实试验,BGLB肉汤管产气即可报告为阳性,一般伴随产气,还会有沉淀、液面有漂浮小气泡的现象。


关于接种挑菌的说法,参加过多次培训,也是各执己见,分享下比较认可的其中一种:分别计数某稀释度2个平皿的典型菌落和可疑菌落数,每个平皿都挑取10个菌进行接种,10个菌的选取按典型和可疑菌落的比例进行,如典型:可疑为21:46,则挑取比例为:3:7。复发酵后分别计算两个平皿的结果,再求取平均值作为该稀释度的大肠菌群报告值。


其实本来还打算探讨霉菌和商业无菌的检验来着,但是看这篇幅,感觉已经刹不住了,有机会下次再探讨,多为培训期间各位老师的交流与分享。

检验检测的工作说起来简单,仔细推敲下,还是会有很多地方会有疑惑,只有一步步的验证,一次次的积累,才能解决这些疑惑,那时,就会有种豁然开朗的感觉。

最后,祝大家的检验工作越来越得心应手!


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食品论坛网友 quanquan920223 原创分享。


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